PCR计算器
计算PCR反应体系各组分体积和反应条件
PCR反应参数
μL
常见值: 25 μL, 50 μL
ng/μL
可选，用于计算模板体积
μL
常用: 1-2 μL
μM
常用: 10-20 μM
μM
常用: 100-200 μM
μL
2× Master Mix常用: 12.5 μL (25μL反应)
PCR反应体系
PCR原理说明
标准PCR体系 (25 μL)
- 2× Master Mix: 12.5 μL
- 正向引物 (10 μM): 1.0 μL
- 反向引物 (10 μM): 1.0 μL
- 模板DNA: 1.0-2.0 μL
- ddH₂O: 补至 25 μL
标准PCR程序
- 预变性: 95°C, 3-5 min
- 变性: 95°C, 30 sec
- 退火: 55-65°C, 30 sec (30-35 cycles)
- 延伸: 72°C, 1 min/kb
- 终延伸: 72°C, 5-10 min
PCR (聚合酶链式反应): 是一种体外扩增DNA的技术，通过反复的变性、退火、延伸三个步骤，在短时间内大量扩增特定的DNA片段。